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SOX5轉(zhuǎn)錄因子SOX-5ELISA試劑盒的熱銷產(chǎn)品:Gab1/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠接頭蛋白Gab 1抗體IgGN-氨-γ-氨氧硅烷 95%Gab2/FITC 熒光標(biāo)記接頭蛋白Gab 2抗體IgG環(huán)氧環(huán)己烷 98%Phospho-Gab1 (Tyr627) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化接頭蛋白Gab 1抗體IgG AR,98.0%Phospho-Gab1 (Ty
產(chǎn)品分類
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公司產(chǎn)品僅用于科研我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
SOX5轉(zhuǎn)錄因子SOX-5ELISA試劑盒 | SOX5 ELISA Kit | 48T/96T | LZ-E028541 |
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣品準(zhǔn)備:
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
腫瘤特異性移植抗原(TSTA)試劑盒 哈帕卜寧 分析標(biāo)準(zhǔn)品5-氨鄰酚 97%
腫瘤特異性移植抗原(TSTA)試劑盒 ??略碓垡蚁┝螓} 平均分子量 Mw ~170,0002-氨-4-二苯 97%
足標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)試劑盒海藻糖5-磷酰核糖-1-焦磷鈉鹽 80%2-氨-2'-二苯 97%
足標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)試劑盒亥茅酚菊酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品AE-活性酯 97%
癌易感蛋白1(BRCA-1)試劑盒含羞草素?zé)o水亞硫 CP,98.0%二硫化二苯并噻唑 98%
癌易感蛋白1(BRCA-1)試劑盒漢防己素哌啶 Standard for GC, ≥99.5% (GC)5-硝-2-酚 98%
T急性淋巴母白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)試劑盒漢仲班 99%2-苯氧苯 99%
T急性淋巴母白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)試劑盒漢黃芩素菲啰 97%4-氨二苯 98%
核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)試劑盒旱蓮AP1,P5-二(腺5′)五磷五鈉鹽 96%1,8-二氨萘 97%
核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)試劑盒旱蓮D一乙酯 99%1,5-二硝萘 97%
硫氧化還原蛋白(Trx)試劑盒蒿本內(nèi)酯1-(4-吡啶)哌 97%鹽聯(lián)苯 AR,99.0%
硫氧化還原蛋白(Trx)試劑盒蒿鄰-(2,3,4,5,6-五氟芐)羥鹽鹽 99%,用于GC鹽乙二 AR,99%
窖蛋白(Cav-1)試劑盒蒿乙鄰-(2,3,4,5,6-五氟芐)羥鹽鹽 98%鹽乙二 CP,98.0%
窖蛋白(Cav-1)試劑盒訶子林鞣DL-3-苯-2-羥 ≥98.0%赤磷 AR,98.5%
普通急性淋巴白血病抗原(CALLA)試劑盒 訶子林鞣DL(±)-3-氨-3-苯 98%黃磷 AR(劇品)
普通急性淋巴白血病抗原(CALLA)試劑盒 訶子鞣2-苯丁酰 98%黃磷 CP(劇品)
SOX5轉(zhuǎn)錄因子SOX-5ELISA試劑盒CFSE/PI 雙染細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒是利用細(xì)胞熒光染料CFSE(CFDA-SE)和PI對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,利用CFSE標(biāo)記靶細(xì)胞,PI標(biāo)記死的靶細(xì)胞來區(qū)分不同的細(xì)胞,活的靶細(xì)胞成綠色,死的靶細(xì)胞成紅色和綠色,從而檢測(cè)細(xì)胞毒性作用。根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì),可以用來檢測(cè)化合物的細(xì)胞毒性作用。也可以用來檢測(cè)殺傷性T 細(xì)胞或NK 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。
CFDA-SE 是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料,可以標(biāo)記活體細(xì)胞。CFDASE是一種帶有琥珀酰亞胺(NHS)的熒光染料,可以結(jié)合細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。CFDASE在結(jié)構(gòu)上將酚羥基部位改造成AM體,所以自身不發(fā)熒光,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的CFDASE的AM 部位能被細(xì)胞內(nèi)酯酶水解生成CFSE,通過共價(jià)結(jié)合賴氨側(cè)鏈的氨基而摻入細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞表面的蛋白,且結(jié)合后發(fā)出強(qiáng)的綠色熒光。CFSE的琥珀酰亞胺(NHS)和細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基部位結(jié)合,固定在細(xì)胞內(nèi),不會(huì)漏出細(xì)胞外。CFSE進(jìn)入細(xì)胞后定位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核,在細(xì)胞核的熒光強(qiáng)。
CFSE毒性小,不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡(jiǎn)單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患??梢愿焖?,更準(zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
CFSE/PI標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測(cè)。
CFSE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,熒光波長(zhǎng):λex=496 nm,λem=516 nm。流式檢測(cè)時(shí)的激發(fā)波長(zhǎng)可以選擇488nm,此時(shí)的發(fā)射波長(zhǎng)為516nm,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)可以采用FL1 detection channel。PI標(biāo)記細(xì)胞呈紅色熒光,流式檢測(cè)時(shí)的激發(fā)波長(zhǎng)可以選擇488nm,此時(shí)的發(fā)射波長(zhǎng)為647nm,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)可以采用FL2 detection channel。
CFSE標(biāo)記的細(xì)胞除了流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞毒性外,還可單染后用于細(xì)胞增殖檢測(cè),或者用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目,或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。
儲(chǔ)存條件:CFSE探針-20℃避光保存;溶解液-20℃保存;PI染色液2-8℃避光保存。
有效期:六個(gè)月。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。