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LAC/LA檢測試劑盒JAK2(Tyrosine-protein kinase JAK2; Janus kinase 2; JAK-2) 蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-2抗原phospho JAK2(phospho-Tyr1007+Tyr1008) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗原
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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產(chǎn)品名稱 | 耐久腸球菌PCR檢測試劑盒價(jià)格 |
英文名稱 | Enterococcus duransPCR |
貨號 | LZP6697 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
2′-脫氧腺苷保存Anti-CYP4A11 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶
兒茶素價(jià)格Anti-CYP3A4 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 內(nèi)分泌病
阿特拉津價(jià)格Anti-CYP4B1 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
烯效唑使用說明書Anti-CYP3A7 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
大豆胨實(shí)驗(yàn)步驟Anti-CYP4F11 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 細(xì)胞分化 表觀遺傳學(xué)
山梨醇麥康克瓊脂基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)步驟Anti-CYP4F2 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)
MH瓊脂使用說明書Anti-CYP4Z1 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 細(xì)胞凋亡
麥芽汁培養(yǎng)基保存Anti-CYP4V2 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 表觀遺傳學(xué)
β-甘油磷酸二鈉五物使用說明書Anti-CYP4X1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶
TMB 法生物素雜交試劑盒5次多少錢Anti-CYP8B1 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
核苷酸類似物法易錯(cuò) PCR 試劑盒15 次品牌Anti-CYTH3 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
免 RNA 提取 RT-PCR 試劑盒 100 次說明書Anti-CYP8B1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒說明書Anti-CYSLTR2 Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 生長因子和激素 內(nèi)分泌病
傳染性膿皰病毒PCR檢測試劑盒圖片Anti-CYSLTR1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞骨架 細(xì)胞外基質(zhì)
副傷寒桿菌PCR檢測試劑盒圖片Anti-CYTIP Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 神經(jīng)生物學(xué) 通道蛋白 細(xì)胞膜受體
3-基-4-甲氧基 聚醚 糠基甲基硫醚
N-(2-甲基-5-硝基苯基)-4-(3-基)-2-嘧啶胺 1,2-丙二醇緩沖液(0.05M,PH9.8) 2-巰基-3-丁醇
3-溴-2--5-*基 3-(N-對磺?;?L-丙酰氧基)-5-苯基吡咯 3-巰基-2-丁
4-甲氧基-3-硝基苯胺 杯[4]芳烴 5-甲基糠醛
CORN STEEP LIQUOR 玉米漿 66071-94-1
Sarsasapogenin 知母皂苷元 82597-74-8
Isosilybin 異飛薊賓 72581-71-6
ISOCOLUMBIN 異古倫賓 471-54-5
大鼠脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: LpPLA2 ELISA Kit
Goat ierleukin 2 (IL-2) ELISA Kit 山羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKIT 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumangranulysin,GNLYELISAKit人顆粒溶素規(guī)格:48T/96T
烏頭酸酶(aconitase)活性熒光定量檢測試劑盒20次
ELISAKitbFGF大鼠堿性成纖維生長因子規(guī)格:48T/96T
耐久腸球菌PCR檢測試劑盒價(jià)格小鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA Kit *
小鼠生長抑素(SS)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Somatostatin,SS ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Retil-binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit*
小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse cyclophilin A,CyPA ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Eotaxin 1 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse eosiphil chemotactic factor,ECF ELISA Kit*
小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse eosiphil cationic protein,ECP ELISA Kit *
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。