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魯氏不動桿菌PCR檢測試劑盒廠家 分子生物試劑

產(chǎn)品簡介

魯氏不動桿菌PCR檢測試劑盒廠家上海聯(lián)祖生物相關產(chǎn)品:
人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)elisa試劑盒Anti-ADIPOQ Antibody(原貨號PB0002)研究領域 細胞生物 染色質(zhì)和核信號 表觀遺傳學
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基2250g供藥品和生物制品中霉菌和酵母菌的計數(shù)、分離和培養(yǎng)用。
Nutrient Agar Tablets 營養(yǎng)瓊脂 Oxoid 100片

更新時間:2023-02-24
訪問次數(shù):993
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

產(chǎn)品名稱

魯氏不動桿菌PCR檢測試劑盒廠家

英文名稱

Acinetobacter lwoffiPCR

貨號

LZP6330

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
人己糖激酶(HK)elisa試劑盒Anti-ADAM2 Antibody研究領域 細胞生物 細胞周期蛋白 細胞分化 表觀遺傳學

11(KLK 11)elisa試劑盒Anti-ADAM2 Antibody研究領域 細胞生物 細胞周期蛋白 細胞骨架 細胞外基質(zhì)

人基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP-14)elisa試劑盒Anti-ADAM28 Antibody研究領域 細胞生物 細胞周期蛋白 細胞分化

人基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)elisa試劑盒Anti-ADAM8 Antibody研究領域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 細胞分化 細胞外基質(zhì)

人黑色素瘤相關抗原D4(MAGED4/MAGED4B)elisa試劑盒Anti-ADAMTS1 Antibody研究領域 細胞生物 細胞周期蛋白 細胞骨架 細胞外基質(zhì)

人核糖體蛋白S9(RPS9)elisa試劑盒Anti-ADAMTS1 Antibody研究領域 細胞生物 細胞周期蛋白 細胞分化

人胱天蛋白酶3(Casp-3)elisa試劑盒Anti-ADAM9 Antibody研究領域 細胞生物 細胞周期蛋白 細胞分化 表觀遺傳學

人骨橋素(OPN)elisa試劑盒Anti-ADAMTS2 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學

人肺炎衣原體(Cpn)抗體(IgG)elisa試劑盒Anti-ADAMTS2 Antibody研究領域 細胞生物 發(fā)育生物學 神經(jīng)生物學

人二氫嘧啶脫氫酶NADP+(DPYD)elisa試劑盒Anti-ADAMTS13 Antibody研究領域 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 通道蛋白 細胞膜蛋白

人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)elisa試劑盒Anti-ADAMTS4 Antibody研究領域 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導

人脆性x三聯(lián)體(FHIT)elisa試劑盒Anti-ADAR Antibody研究領域 細胞生物 神經(jīng)生物學 通道蛋白 細胞膜蛋白

人腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)elisa試劑盒Anti-ADH1A Antibody研究領域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 細胞骨架 細胞外基質(zhì)

人腸三葉因子(ITF)elisa試劑盒Anti-ADAMTS4 Antibody研究領域 細胞生物 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 細胞膜受體 Alzheimer's

人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)elisa試劑盒Anti-ADIPOQ Antibody(原貨號PB0002)研究領域 細胞生物 染色質(zhì)和核信號 表觀遺傳學

玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基2250g供藥品和生物制品中霉菌和酵母菌的計數(shù)、分離和培養(yǎng)用。

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棉花立枯菌 葡萄酒酵母 /瓶

大腸桿菌O培養(yǎng)基

抗生素檢定培養(yǎng)基3號(usp) 250g 藥品抗生素效價測定

x麥康克瓊脂基礎  SMAC  250克  大腸桿菌O157:H7的選擇性分離培養(yǎng)

MUG培養(yǎng)基  MUG-Medium(with Kovacs)  培養(yǎng)基20g+靛基質(zhì)20m  大腸埃希氏菌快速熒光測定

三糖鐵培養(yǎng)基  Triple Sugar Iron Agar  250克  腸桿菌科細菌的生化試驗

SS瓊脂  Salmonella Shigella Agar  250克  沙門氏菌屬和志賀氏菌屬的分離培養(yǎng)
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2-(Trifluoromethyl)benzamide,97%通用試劑 1G


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